محیط کشت ای ام بی اگار یا اگار ائوزین متیلن بلو EMB Agar

محیط کشت ای ام بی اگار یا اگار ائوزین متیلن بلو EMB Agar :

EMB Agar or Eosin methylene blue Agar

محیط کشت EMB Agar  (ای ام بی اگار یا اگار ائوزین متیلن بلو) یک محیط کشت انتخابی- افتراقی میباشد، در واقع یک محیط کشت انتخابی باکتری های گرم منفی علیه باکتری های گرم مثبت می باشد و محیط کشت افتراقی برای  جدا کردن  باکتریهای میله ای روده ای گرم منفی می باشد.محیط کشت اگار ائوزین متیلن بلو شامل ترکیبات ژلاتین(به عنوان منبع نیتروژن در EMB Agar) ،لاکتوز، بافر، ائوزین Y ، متیلن بلو، اگار ، ساکارز می باشد.در واقع وجود لاکتوز در EMB Agar به جدا سازی تخمیر کننده لاکتوز از غیر تخمیر کننده لاکتوز کمک میکند.ائوزین و متیلن بلوهم به عنوان شاخص های PH  می باشند.

کاربردهای EMB Agar:

مبنای جداسازی محیط کشت ای ام بی بر اساس به کار گیری دو رنگ شاخص متیلن بلو و ائوزین هست در واقع با وجود این رنگ ها ارگانیسمهای تخمیر کننده لاکتوز از غیر تخمیر کننده لاکتوز شناسایی می شوند زیرا اسید تولید شده به وسیله میکرو ارگانیسم های نخمیر کننده لاکتوز در ترکیب با این رنگها منجر به کلنهای رنگی می شود و در ادامه می توان از رنگ کلنی های ایجاد شده روی محیط کشت EMB Agar باسیل های گرم منفی را از همدیگر شناسایی کرد،همچنین ترکیب این دو رنگ مانع از رشد بسیاری از باکتری های گرم مثبت می شود.

روش ساخت محیط کشت EMB Agar:

36 گرم از محیط کشت ای ام بی  اگار را در یک لیتر اب مقطر حل کرده سپس حرارت میدهیم تا کاملا محیط کشت محلول شود سپس در دمای 121 درجه سانتی گراد به مدت  15دقیقه اتوکلاو می کنیم تا استریل شود و در اخر در دمای مناسب قرار می دهیم تا سرد شود و داخل پلیت های استریل پخش می کنیم.

روش کشت در محیط کشت EMB Agar:

نمونه ها رو به صورت خطی به محیط کشت تلقیح میکنیم و در دمای 35+2 درجه سانتیگراد به مدت18  الی 24 ساعت انکوبه می کنیم.

• نتایج حاصل:

  اشیرشیا کلای کلنی های گرد و بزرگ که جلای سبز رنگ دارد تولید می کنند.غیر تخمیر کننده های لاکتوز کلنی های بی رنگ یا بنفش کم رنگ تولید می کنند ،بعضی از تخمیر کننده های لاکتوز کلنی های بزرگتری که حالت موکیدی و اغلب مرکزیت آنها بنفش هستند را تولید می کنند،سودوموناس ائوروژینوزا کلنی های بی رنگ تولید می کند.